КУЛЬТУРА КЛЕТОК И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ - ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ИСТОЧНИК ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СЫРЬЯ. Сохранение коллекции культуры ткани растений проводят
Донор — это (один верный ответ) — МегаЛекции
Бета-ферон
виферон
берофор
Обратная транскриптаза используется в технологии рекомбинантных ДНК поскольку (один верный ответ)в) специфически расщепляет двухцепочечную ДНК по сайтам узнаванияа) катализирует ковалентное связывание углеводно-фосфорной цепи ДНК гена и ДНК вектораб) катализирует синтез комплементарной ДНК на матрице РНК, соответствующей гену-мишенид) несцифически расщепляет одноцепочечные участки нуклеиновых кислотг) катализирует синтез нуклеотидной цепи из отдельных нуклеотидов
Ослабление ограничений на использование в промышленности микроорганизмов-рекомбинантов, продуцирующих гормоны человека стало возможным благодаря (один верный ответ)б) повышению квалификации персонала, работающего с рекомбинантамив) установленной экспериментально слабой жизнеспособности рекомбинантаа) совершенствованию методов изолирования генно-инженерных рекомбинантов от окружающей средыг) экспериментальному подтверждению обязательной потери чужеродных генов
Поиск новых рестриктаз для использования в технологии рекомбинантных ДНК объясняется (один верный ответ)г) высокой стоимостьюб) различным местом воздействия на субстрата) различиями в каталитической активностив) видоспецифичностьо
В качестве адъювантов в состав химических вакцин вводят
д) фосфат кальция
в) адъювант Фрейнда
г) липосомы
А) гидроксид алюминия
Е) каолин
Б) мурамил-дипептид
Прямой перенос чужеродной ДНК в протопласты возможен с помощью (один верный ответ)в) упаковки в липосомыа) микроинъекцииб) трансформацииг) культивирования протопластов на соответствующих питательных средах
Технология рекомбинантного человеческого гранулоцитарно-макрофагального фактора (ГМ-КСФ) для производства препарата лейкомакс основана на экспрессии гена (один верный ответ)
а) в культуру клеток яичников китайского хомячка
в) в клетках дрожжей-сахаромицетов
д) в клетках уксуснокислых бактерий
г) в культуре клеток эмбрионов человека
Рекомбинантные продуценты интерлейкинов
в) псевдомонады
А) кишечная палочка
г) сенная палочка
Б) дрожжи-сахаромицеты
Природная роль лигаза) защита бактериальных клеток от инфицирования фагамиб) ограничение скрещивания между различными бактериальными видами и штаммамиг) соединение молекул ДНК бактерий и бактериофагав) воссоединение молекул ДНК бактерий после расщепленияд) интеграция генома ретровируса в виде ДНК в хромосомы клетки хозяина
В качестве генов-маркеров используютб) гены синтеза лигазд) гены синтеза ферментов, расщепляющих неспецифический субстрата) гены синтеза незаменимых аминокислотв) гены синтеза рестриктазг) гены антибиотикоустойчивости
Интроны это (один верный ответ):д) отрезок РНК, подвергающийся обратной транскрипциив) участки генов прокариотических клеток, несущие генетическую информацию, кодирующую синтез белкаг) отрезок ДНК, подвергающийся репарацииб) участки генов эукариотических организмов, которые не несут генетической информацииа) участки генов эукариотических организмов, несущие генетическую информацию, кодирующую синтез белка
Ауксины это (один верный ответ)а) гормоны растений, производные индола, образуются в апикальных меристемах и стимулирующие клеточные растяжение и дедифференцировку клетокв) гормоны растений, производные 6-аминопурина, задерживающие старение срезанных органов и обеспечивающие деление дедифференцированных клетокг) микроорганизмы, клетки которых содержат нужный ген или ассоциированы с клетками растенийб) фрагменты тканей, инкубируемых самостоятельно или используемых для получения первичного каллуса
Тотипотентность этог) способность любой клетки растения образовывать полноценное растениеа) способность любой клетки растения к росту, делению, органообразованию, вторичному метаболизмув) свойство соматических клеток растения полностью реализовывать свой потенциал развития при определенных условиях культивированияд) нет верных ответовб) свойство клеток растений реализовывать генетическую информацию ядра, обеспечивающую их дифференцировку, а также развитие до целого организма
Из культуры ткани Барвинка розового выделяютв) панаксазидыб) винкристина) аймалицинг) катарантинд) серпентин
Фитогормоныв) обеспечивают пролиферацию дедифференцированных клетока) являются индукторами первичного и вторичного метаболизмаб) обеспечивают процесс дедифференцировки клеток и подготовки их к делению г) стимулируют дифференцировку и пролиферацию клеток
Индукторами реализации тотипотентности клеток и тканей растений являются (один верный ответ)г) фитогормоны а) Уф-облучениед) предшественники метаболитовв) аминокислотыб) витамины
Превращение карденолида дигитоксина в менее токсичный дигоксин (12-гидроксилирование) осуществляется культурой клеток (один верный ответ)а) Acremonium chrysogenumб) Saccharomyces cerevisiaeв) Digitalis lanataг) Tolypocladum inflatum
Культура тканей растений это (один верный ответ)а) выращивание лекарственных растений на опытном полев) выращивание в стерильных искусственных условиях изолированных клеток, тканей, органов растений на твердых или жидких питательных средахб) культивирование микроорганизмов, усвоивших ген растения, ответственный за синтез определенного БАВ
Время генерации клетки - это (один верный ответ)б) цикл развития клетки от пресинтетической фазы до фазы митоза с последующей дифференцировкойв) интервал времени между двумя последовательными клеточными делениями а) рост популяции клеток в цикле периодического выращивания, характеризующийся S-образной кривой
Оффлайн сообщение (11:39:05 13/12/2014)Интенсивность синтеза алкалоидов культурой тканей Катарантуса розового можно повысить в результате (один верный ответ)в) внесения фитопатогенов б) внесения предшественникова) воздейсвия УФ-лучами
Из культуры ткани Раувольфии змеиной выделяют (один верный ответ)б) шиконинг) рутина) антоцианыв) аймалин
Клетки культуры ткани растений иммобилизируют, если целевой продуктв) локализован внутри клеткиа) водорастворим б) нерастворим в водед) им является биомасса клетокг) секретируется в питательную среду
Эксплант это (один верный ответ)г) культура, возникшая из одной клеткиб) фрагменты каллуса для субкультивированияв) часть суспензионной культуры для субкультивированияа) изолированные из растения фрагменты ткани
Эксплант стерилизуют методом (один верный ответ)в) радиационнымб) химическима) термическим
Клеточный цикл это (один верный ответ)а) существование клетки отделения до следующего деления или смерти г) период от последнего митоза до смерти клеткиб) рост популяции клеток в цикле периодического выращивания, характеризующийся S-образной кривойв) интервал времени между двумя последовательными митозамид) выход клетки в состояние покоя
Из культуры клеток Воробейника краснокорневого выделяют (один верный ответ)а) рутинб) антоцианыд) убихинонг) шиконинв) панаксозиды
Культура клеток Женьшеня осуществляет (один верный ответ)г) синтез аймалицинаб) синтез шиконинав) синтез берберинаа) синтез панаксозидовд) биоконверсию убихинона
Главный критерий отбора продуцента в качестве биообъекта (один верный ответ)г) способность расти на дешёвых питательных средахв) способность синтезировать целевой продукт а) быстрое накопление биомассыб) устойчивость к заражению посторонней микрофлорой
Репарация это (один верный ответ)а) обратное мутирование к исходному фенотипув) процесс слияния лимфоцитов и миеломных клетокб) механизм исправления повреждений ДНК г) отбор клеток по определённым признакам
Условия сохранения протопластов в клеточной инженерииналичие в среде полиэтиленгликолянизкая температура гипотоническая средагипертоническая среда
Ферменты, в зависимости от катализируемой реакции, подразделяют на классые) лиазыв) трансферазыг) изомеразы д) синтетазыа) оксиредуктазыб) гидролазыж) нет верных ответов
Внутренние мутацииа) трансверсияв) дупликацияг) транзицияб) инверсия
Эукариотами являютсяг) эубактериив) водоросли е) простейшиеа) дрожжид) актиномицетыб) грибы
Высокая стабильность протопластов достигается при хранениив анаэробных условияхв гипертонической среде при пониженной температурев среде с добавлением антиоксидантов
Объединение геномов клеток разных видов и родов возможно при соматической гибридизации (один верный ответ)б) только в искусственных условиях в) в природных и искусственных условияха) только в природных условиях
За образованием протопластов из микробных клеток можно следить с помощью метода (один верный ответ)в) фазово-контрастной микроскопииа) вискозиметрииб) колориметрииг) электронной микроскопии
Гибридомы образуются в результате слияния (один верный ответ)в) В-лимфоцита и миеломной клеткиг) антигена и В-лимфоцитаа) лимфоцитов и вируса Сендайб) Т-киллера и миеломной клеткид) антигена и Т-лимфоцита
Для получения протопластов из клеток грибов используется (один верный ответ)б) трипсинв) «улиточный фермент»а) лизоцимг) пепсин
Культивирование гибридом осуществляют методом in vivoа) на мышахг) на кошкахб) на кроликахв) на крысах
Компоненты регуляции согласно модели оперонав) операторд) интрона) структурный генб) ген-регуляторг) промотор
Для протопластирования наиболее подходят суспензионные культуры (один верный ответ)д) в стационарной фазеа) в лаг-фазеб) в фазе ускоренного ростае) в фазе отмиранияв) в логарифмической фазег) в фазе замедленного роста
Регуляция биосинтетических путей по принципу обратной связи осуществляется способамиа) индукцииб) ретроингибированиев) репрессии
Фузогенными агентами являютсяб) катионы д) зимолаза виноградной улиткиа) магнитное поле е) органические кислотыв) полиэтиленгликольг) лизоцим
Реверант это (один верный ответ)в) отрезок молекулы ДНКб) органоид клеточного ядраа) организм, возникший в результате мутацииг) организм, возникший в результате повторной мутации
В экспоненциальную фазу роста клетки синтезируют (один верный ответ)б) вторичные метаболитыа) первичные метаболиты
Методы разделения культуральной суспензиив) флотацияд) центрифугированиег) фильтрование б) седиментацияа) дезинтеграция
Обязательность валидации при замене в производстве штамма продуцента лекарственного вещества его более активным мутантом обусловлена (один верный ответ)в) возможностью появления новых примесей в целевом продуктеб) изменением химической структуры целевого продукта а) требованиями промышленной гигиеныг) необходимостью повышения квалификации персонала
Генно-инженерные штаммы микроорганизмов – деструктаторы используюта) для разложения и детоксикации негниющих синтетических веществв) для очистки бытовых сточных водд) для очистки отработанного воздухаг) для утилизации твёрдых мицеллряных отходовб) часы пиковой нагрузки на систему очистки промышленных отходов
Согласно GСР в обязанности этических комитетов входят (один верный ответ)б) защита прав больных, на которых испытываются новые лекарственные препараты в) утверждение назначаемых режимов леченияа) контроль санитарного состояния лечебно-профилактических учрежденийг) контроль за соблюдением внутреннего распорядка
В стационарную фазу роста клетки синтезируют (один верный ответ)а) первичные метаболитыб) вторичные метаболиты
В состав активного ила входятг) простейшие б) бактериофагиа) вирусыв) бактериид) сине-зелёные водоросли
Механические пеногасители представляют собойг) фильтрыд) аэраторые) ресиверыа) мешалки в) диффузорыб) сепараторы
Микроорганизмы по механизму питания и дыхания подразделяются наб) гетеротрофыа) автотрофыг) хемолитотрофыв) ауксотрофыд) лактотрофы
Пеногасители классифицируют наг) мембранныев) акустическиеб) химическиеа) механические
Стерилизация питательной среды в биотехнологическом производстве осуществляется (один верный ответ)в) острым парома) ультрафиолетовым облучениемг) глухим паромб) введением консервантовд) горячим воздухом
При непрерывном процессе ферментации биообъект поддерживают в фазе роста (один верный ответ)г) деградацииа) латентнойв) стационарнойб) экспоненциальной
Дезинтеграцию клеток бактерий проводят (один верный ответ)б) зимолазой виноградной улиткиг) бромелайнома) лизоцимомв) пепсином
Испытание на содержание веществ гистаминоподобного действия проводят (один верный ответ)д) на обезьянахб) на кроликаха) на людях-добровольцахв) на кошкахг) на крысах
Направления использования твёрдых мицеллярных отходов биотехнологических производствв) как компонент топливаб) в качестве пеногасителя в биореактораха) как субстрат или компонент субстрата для роста других видов микроорганизмов г) в составе строительных материаловд) в качестве лекарственных средств
Постоянное присутствие штаммов-деструктаторов в аэротенках малоэффективно; периодическое внесение их коммерческих препаратов вызвано (один верный ответ)в) потерей плазмид, где локализованы гены окислительных ферментов б) их вытеснением представителями микрофлоры активного илаа) слабой скоростью их размноженияг) проблемами техники безопасности
Аппараты, в которых осуществляется деструкция органических загрязнений сточных вод, называются (один верный ответ)г) регенераторыа) усреднителиб) отстойникив) аэротенки
В методе ультрафильтрации в отличие от обратного осмосав) отделение молекул воды и низкомолекулярных веществг) диффузия основной механизм прохождения через мембрануб) больший размер пор полупроницаемой мембраны а) более высокое давление процесса
Для периода антибиотиков характерноа) производство пенициллина и других антибиотиковд) получение моноклональных антителг) микробиологическая трансформация стероидовб) культивирование растительных клеток в) получение вирусных вакцин
Целевой продукт, получаемый в результате биотехнологического производства, может быть представленб) культуральной жидкостьюг) внутриклеточным метаболитома) биомассой клетокв) внеклеточным метаболитом
Значение кайромонов как сигнально-коммуникативных веществ для секретирующего организма (один верный ответ)б) ограничение популяции в) узнавание на территорииа) адаптативно выгодноег) половые аттрактанты
Разработка технологии рекомбинантных ДНК относится к периоду развития биотехнологии (один верный ответ)д) новой и новейшей биотехнологииа) допастеровскомуб) послепастериовскомуг) управляемого биосинтезав) антибиотиков
Этапы новой и новейшей биотехнологиив) синтез биополимеров по установленной структурег) экспрессия гена человека в бактериальных клеткаха) установление структуры ДНК и расшифровка генетического кодаб) автоматическое определение аминокислотной последовательности белков д) синтез аминокислот и витаминов
Биотехнология направление научно-технического прогресса в медицине и фармации по получению лекарственных средств с использованиемб) макоорганизмов животного происхожденияа) микроорганизмовд) мультиферментных комплексовв) химических реакцийг) патогенных микроорганизмов
[email protected] (00:37:16 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:35:58 13/12/2014)кр 1 науг
[email protected] (00:37:16 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:36:06 13/12/2014)Значение алломонов как сигнально-коммуникативных веществ для секретирующего организма (один верный ответ)а) адаптативно выгодноев) узнавание на территорииб) ограничение популяцииг) воловые аттрактанты
[email protected] (00:37:16 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:36:30 13/12/2014)1
Возникновение геномики как научной дисциплины стало возможным после (один верный ответ)г) полного секвенирования генома ряда организмов б) создания концепции генаа) установления структуры ДНКв) дифференциации регуляторных и структурных участков гена
Разработка гибридомной технологии относится к периоду развития биотехнологии (один верный ответ)д) новой и новейшей биотехнологииг) управляемого биосинтезав) антибиотиковб) послепастериовскомуа) допастеровскому
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:40:33 13/12/2014)1
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:40:43 13/12/2014)Феромоны как сигнально-коммуникативные вещества изменяют поведение (один верный ответ)а) особей других видовб) особей своего вида
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:41:39 13/12/2014)1
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:41:49 13/12/2014)Биогаз это (один верный ответ)в) пары этанолаа) смесь метана с диоксидом углеродаг) смесь водорода с диоксидом углеродаб) смесь водорода с азотом
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:42:20 13/12/2014)2
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:42:28 13/12/2014)Значение феромонов как сигнально-коммуникативных веществ для секретирующего организмав) узнавание на территорииг) половые аттрактантыа) адаптативно выгодноеб) ограничение популяции
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:44:09 13/12/2014)всенауг
Биотехнология является заключительным этапом в процессе производствав) аминокислот при ферментативном разделении рацематной смесид) рекомбинантного инсулинаг) аскорбиновой кислотыб) гюлусинтетических антибиотикова) аминокислот химико-ферментативным методом
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:48:06 13/12/2014)15
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:48:08 13/12/2014)науг
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:48:18 13/12/2014)Цели создания трансгенных животныха) увеличение продуктивностид) нет верных ответовв) ксенотрансплантация органов человекуг) продукция лекарственных веществ и продуктов лечебного питанияб) невосприимчивость к болезням
[email protected] (00:37:17 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:49:58 13/12/2014)все нау
Направления использования биотехнологии в растениеводствеж) нет верных ответаб) биодеградация пестицидовв) биологическая защита растений от вредителей в патогеновг) применение биологических удобрений, биореiуляторов и биости муляторов ростае) оздоровление и размножение посадочного материала и получение гибридовд) создание трансгенных растенийа) выведение новых сортов растений на основе клеточной и генной инженерии
Колоночный биореактор для иммобилизации целых клеток долженотличатся от реактора для иммобилизации ферментов (один верный ответ)г) формой частиц нерастворимого носителяв) более быстрым движением растворителяб) отводом газова) большим диаметром колонки
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:54:25 13/12/2014)3
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:54:32 13/12/2014)Удаление лактозы из молока осуществляют с помощью иммобилизованного фермента (один верный ответ)а) уреазыв) β-галактозидазыд) глюкозооксидазыб) глюкозоизомеразыг) лактатдегидрогеназы
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:55:03 13/12/2014)2
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:55:10 13/12/2014)Фермент лактаза относится к классу (один верный ответ)а) липазв) изомеразб) трансферазе) лиазд) оксиредуктазг) гидролаз
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:55:40 13/12/2014)посл
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:55:48 13/12/2014)Фермент амилоглюкозидазу, осуществляющий гидролиз олигосахаров до глюкозы, для производственных процессов получают из культуры (один верный ответ)б) Ваcillus subtillusа) Aspergillus nigerв) Васillus соаgulansд) Lactobacillus brevisг) Аrthrobacter simplex
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:58:03 13/12/2014)1
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:58:11 13/12/2014)Методы иммобилизациив) ферментативныег) химическиеа) физическиеб) физико-химические
[email protected] (00:37:18 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:58:38 13/12/2014)23нау
Иммобилизация индивидуальных ферментов ограничивается таким обстоятельством, как (один верный ответ)в) наличие у фермента субъединицг) принадлежность фермента к гидролазама) высокая лабильность ферментаб) наличие у фермента кофермента
Амилоглюкозидаза в биотехнологическом производстве используется с целью (один верный ответ)а) гидролиза крахмалав) превращения глюкозы во фруктозуб) гидролиза олигосахаров до глюкозыг) гидролиза лактозы до глюкозы и галактозы
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:59:16 13/12/2014)3нау
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (13:59:23 13/12/2014)Увеличение выхода целевого продукта при биотрансформации стероида достигается (один верный ответ)а) при увеличении интенсивности перемешиванияд) при увеличении концентрации стероидного субстрата в ферментационной средев) при повышении температуры ферментацииг) при исключении микробной контаминацииб) при увеличении интенсивности аэрациие) при целенаправленном изменении химической структуры стероидного субстрата
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (14:00:04 13/12/2014)2
Активирование нерастворимого носителя необходимо (один верный ответ)а) для усиления включения фермента в гельв) для повышения активности ферментаг) для образования ковалентной связиб) для повышения сорбции фермента
Термин «мультиферментньй комплекс» означает (один верный ответ)а) комплекс ферментных белков, выделяемый из клетки путем экстракции и осажденияв) комплекс ферментов, катализирующих синтез первичного или вторичного метаболита б) комплекс ферментов клеточной мембраныг) комплекс экзо- и эндопротеаз
Методы удержания кофермента в реакционной системе с иммобилизованным ферментома) ковалентная иммобилизация на ферменте через спейсерв) увеличение массы молекулы кофактора за счёт сшивки с водорастворимым полимером и установка ультрафильтраг) адсорбция на ферментеб) ковалентная иммобилизация на полимерном носителе фермента через спейсер
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (14:01:40 13/12/2014)2
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (14:01:47 13/12/2014)науг
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (14:01:55 13/12/2014)Достоинства органических носителей для иммобилизациид) возможность изменять набухающую способностье) имеют гладкую структуруг) имеют развитую пористую структуруа) легко подвергаются химической модификацииб) возможность варьировать механическую прочностьв) возможность варьировать проницаемость мембран
[email protected] (00:37:19 15/12/2014)
Оффлайн сообщение (14:02:16 13/12/2014)135нау
К методам химической иммобилизации ферментов относятсяг) нейтрализацияб) азосочетаниев) использование бифункциональных соединенийа) ацетилирование д) восстановление
Выход продуктов вторичного метаболизма выше (один верный ответ)б) в суспензионных культураха) в каллусных культурах
[email protected] (21:04:22 16/12/2014)
Из культуры ткани Стевии выделяют (один верный ответ)г) рутина) диосгенинв) антоцианыб) стевиозидд) шиконин
Эксплант стерилизуютб) обработкой растворами солей ртути с добавлением ПАВг) обработкой растворами йода с добавлением ПАВв) мембранной фильтрациейа) УФ-облучениемд) обработкой растворами водорода пероксида с добавлением ПАВ
[email protected] (21:17:24 16/12/2014)
[email protected] (21:17:28 16/12/2014)
тема16
[email protected] (21:17:40 16/12/2014)
В качестве стерилизующих растворов используют растворы натрия гипохлорита, водорода пероксида, солей ртути с добавлением поверхностно-активных веществ (ПАВ) для лучшего смачивания.
Основные компоненты питательной среды для культуры тканей растенийг) микроэлементыж) пепсинв) макроэлементыб) фитогормоныд) витаминыа) сахарозае) аминокислоты
Культуры клеток и тканей растений обеспечиваюта) получение веществ, присущих интактному растениюд) возможность получения веществ, отсутствующих в исходном растениив) биотрансформацию БАВб) синтез не свойственных интактному растению БАВ, присущих труднокультивируемым растениямг) возможность изучения процессов, протекающих в клетке
Эксплант выполняет в биотехнологическом процессе функцию (один верный ответ)в) субкультивирования культурыб) получения первичного каллусаа) регуляции роста и синтеза метаболитовг) субкультивирования каллусной культуры
[email protected] (21:32:38 16/12/2014)
Возможность управления процессами культивирования тканей растений выше (один верный ответ)а) в суспензионных культурахб) в каллусных культурах
Сохранение коллекции культуры ткани растений проводята) каллусным методомб) суспензионным методомв) методом криоконсервации
Из культуры ткани Solanum laciniatum выделяюта) β-каротинд) резерпинб) соласодинг) аймалинв) соласонин
[email protected] (21:41:10 16/12/2014)
Культура тканей растений – это (один верный ответ)а) выращивание лекарственных растений на опытном полев) выращивание в стерильных искусственных условиях изолированных клеток, тканей, органов растений на твердых или жидких питательных средахб) культивирование микроорганизмов, усвоивших ген растения, ответственный за синтез определенного БАВ
Клеточный цикл – это (один верный ответ)д) выход клетки в состояние покояб) рост популяции клеток в цикле периодического выращивания, характеризующийся S-образной кривойг) период от последнего митоза до смерти клеткив) интервал времени между двумя последовательными митозамиа) существование клетки отделения до следующего деления или смерти
[email protected] (21:48:44 16/12/2014)
Моноклональные антитела очищают методамиг) электродиализаа) ионообменной хроматографиив) афинной хроматографии б) гель-хроматографиид) лиофилизации
Культивирование гибридом in vitro осуществляют в биореакторах (один верный ответ)б) эрлифного типаа) барботажного типав) циркуляционного типа
[email protected] (22:01:51 16/12/2014)
2нау
[email protected] (22:02:45 16/12/2014)
Создание сверхпродуцентов целевого продукта основано на мутационном повреждении аллостерического центраб) последнего фермента метаболической цепив) белка-репрессораа) первого фермента метаболической цепи
[email protected] (22:02:46 16/12/2014)
[email protected] (22:04:43 16/12/2014)
Скрининг лекарственных средств - это (один верный ответ)г) полный химический синтеза) совершенствование путём химической трансформациив) поиск и отбор («просеивание») природных структурб) совершенствование путем биотрансформации
[email protected] (22:04:43 16/12/2014)
[email protected] (22:10:27 16/12/2014)
С целью хранения моноклональные антитела (один верный ответ)в) замораживают при температуре жидкого азотаб) подвергают лиофильной сушкеа) замораживают при температуре -20 градусов по Цельсию в сыворотке крови
[email protected] (22:10:34 16/12/2014)
1нау вроде так
[email protected] (22:10:40 16/12/2014)
в теме 3,22
[email protected] (22:14:34 16/12/2014)
Этапы получения гибридом:д) селекция гибридоме) селекция В-лимфоцитова) селекция миеломных клетокг) гибридизация клеток миеломы и В-лимфоцитовб) иммунизация мышей антигеномв) получение В-лимфоцитов
[email protected] (22:14:39 16/12/2014)
[email protected] (22:14:43 16/12/2014)
т 3,2,2
[email protected] (22:15:35 16/12/2014)
Биосинтез ферментов синтеза метаболитов прекращается в результате присоединения (один верный ответ)в) белка-репрессора к промоторуа) индуктора к белку-репрессоруб) белка-репрессора к оператору
[email protected] (22:15:35 16/12/2014)
[email protected] (22:16:19 16/12/2014)
Зимолаза виноградной улитки обеспечивает получение протопластов (один верный ответ)б) клеток грибовд) бактерийа) клеток растенийг) актиномицетовв) клеток животных
[email protected] (22:16:19 16/12/2014)
Для получения протопластов из бактериальных клеток используется (один верный ответ)г) пепсинб) «улиточный фермент»в) трипсина) лизоцим
Транзиция – это вид внутригенной мутации, заключающийсяв) в замене пиримидина на другой пиримидинг) в замене пиримидина на пурина) в замене пурина на пиримидинб) в замене пурина на другой пурин
[email protected] (22:17:58 16/12/2014)
Для получения гибридом В-лимфоциты, выделяют из тканей (один верный ответ)г) кишечникаа) печенив) тимусад) поджелудочной железыб) селезёнки
Получение глюкозо-фруктозных сиропов из крахмала основано на использовании ферментовг) β-галактозидазыб) глюкоизомеразыд) лактатдегидрогеназыв) α-амилазыа) амилоглюкозидазы
[email protected] (22:31:55 16/12/2014)
ток 2
[email protected] (22:33:06 16/12/2014)
β-галактозидаза используется (один верный ответ)в) при получении безлактозного молокаб) при разделении рацематной смеси аминокислота) при получении полусинтетических пенициллиновг) при получении глюкозо-фруктозных сироповд) при получении простагландинов
[email protected] (22:33:07 16/12/2014)
[email protected] (22:35:45 16/12/2014)
Простаноиды получают в результате ферментного превращенияв) арахидоновой кислотыб) аспарагиновой кислотыа) галактозыг) стероидных структур растенийд) кукурузного крахмала
[email protected] (22:35:49 16/12/2014)
1 ток 1
[email protected] (22:37:14 16/12/2014)
Пенициллинацилаза используется (один верный ответ)г) при снятии аллергических реакций на пенициллина) при проверке заводских серий пенициллина на стерильностьб) при оценке эффективности пенициллиновых структур против резистентных бактерийв) при получении полусинтетических пенициллинов
[email protected] (22:37:14 16/12/2014)
Рекомендуемые страницы:
Воспользуйтесь поиском по сайту:
megalektsii.ru
Культура клеток и тканей растений — перспективный источник получения лекарственного сырья
В самом общем смысле культура клеток и тканей (далее — культура тканей) — это искусственное in vitro индуцирование делений клеток или выращивание в пересадочной культуре тканей, возникших путём пролиферации клеток изолированных сегментов разных частей растения.
Основоположниками культуры растительных тканей как новой области биологической науки считаются Ф. Уайт и Р. Готре (начало XX в.). В конце 30-х гг. XX в. был разработан метод выращивания растительных клеток в суспензионной культуре и получения биомассы от единичных клеток, что позволило выделять однородный в генетическом и физиологическом отношении материал.
В странах бывшего СССР освоение метода культуры тканей начато с конца 50-х гг. XX в. и связано с именем Р.Г. Бутенко. В 1967 … г. по инициативе И.В. Грушвицкого в Ленхимфарминституте (ныне Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия) была создана первая в стране лаборатория культуры тканей лекарственных растений. Позже подобные лаборатории были созданы во Всероссийском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) (Москва) и Томском медицинском институте (ныне Сибирский государственный медицинский университет).
Первоначально разрабатываемый в чисто теоретическом плане метод культуры тканей, начиная с середины 60-х годов XX в., входит в арсенал особого направления научно-производственной деятельности, известного под названием биотехнология. Технологии, основанные на методе культуры тканей, уже помогают создавать новые формы и сорта сельскохозяйственных растений и получать промышленным путём продукты растительного происхождения.
Все объекты, культивируемые in vitro, выращиваются стерильными. Стерилизуются исходные кусочки ткани растений (экспланты), питательная среда; антисептически в специальных боксах стерильным инструментом проводятся манипуляции по выращиванию объектов. Сосуды, в которых культивируются ткани и клетки, закрываются так, чтобы предотвратить инфицирование в течение продолжительного времени.
В культуре тканей лекарственных растений можно выделить три главных направления: получение недифференцированной каллусной массы, создание исходного генетического разнообразия форм растений, а также клеточную селекцию и клональное микроразмножение растений.
В природе каллусообразование — естественная реакция на повреждение растений. В культуре изолированных тканей при помещении экспланта (т.е. фрагмента ткани или органа) на питательную среду его клетки дедифференцируются, переходят к делению, образуя однородную недифференцированную массу — каллус.
В асептических условиях каллус отделяют и помещают на поверхность агаризованной питательной среды для дальнейшего роста. В результате получают культуру каллусной ткани, которую можно поддерживать неограниченно долго, периодически разделяя её на трансплантаты и пересаживая на свежую питательную среду.
Каллусы легко образуются на эксплантах из различных органов и частей растений: отрезков стебля, листа, корня, проростков семян, фрагментов паренхимы, тканей клубня, органов цветка, плодов, зародышей и т.д. Культивирование каллусных клеток проводят главным образом двумя способами: на агаризованных питательных средах или различных гелеобразующих подложках (силикагель, биогели, полиакриламидные гели, пенополиуретан и др.) и в жидкой питательной среде. В жидкой питательной среде каллус легко распадается на отдельные агрегаты клеток и даёт начало так называемой суспензионной культуре.В разработке нетрадиционных клеточных технологий важное место занимают питательные среды. Они должны обеспечить потребности культуры ткани продуцента в химических компонентах, необходимых для биосинтеза целевого продукта. В состав сред входят смеси минеральных солей (макро- и микроэлементов), фитогормоны (регуляторы процессов клеточного деления и дифференциации), источники углерода в виде сахарозы. Имеют значение температура, освещение, содержание газов и другие условия.Одна из важных особенностей культуры тканей — сохранение в ряде случаев способности к синтезу продуктов вторичного метаболизма, свойственных интактным растениям данного вида, — алкалоидов, гликозидов, компонентов эфирных масел, стероидов и др.
В культивируемых каллусных клетках, особенно при длительном выращивании in vitro, возникают, сохраняются в клеточных поколениях, а часто и селектируются, т.е. отбираются и начинают преобладать, многочисленные геномные вариации. Эта изменчивость представляет собой основу для отбора клеточных линий и штаммов с высокой биосинтетической способностью (суперпродуцентов). Хотя использование сырья, получаемого при культуре тканей и клеток in vitro, выгодно пока только для тех продуктов, рыночная стоимость которых достаточно высока на международном рынке, тем не менее, биотехнологические программы уже созданы в СНГ и многих странах мира.
Переход от научных разработок к промышленному получению продуктов с использованием клеточных культур только начинается. Однако этим методом уже получают некоторые высокоценные вещества и продукты. В Японии из культивируемых тканей воробейника краснокорневого получают шиконин с широким спектром антисептического действия и убихинон-10 из клеток табака, в Германии — кислоту розмариновую из колеуса. В нашей стране биохимические заводы выпускают клеточную биомассу женьшеня, а также получены высокоаймалиновые штаммы раувольфии змеиной.
Каллусные клетки в культуре тканей in vitro подвержены значительной генетической изменчивости. Изменчивость геномов может приводить к генетическим изменениям у растений-регенерантов, полученных из культуры каллусных клеток, клеточных суспензий или изолированных протопластов. Такие растения получили название сомаклональных вариантов. Сомаклональные варианты, сохраняя основные свойства прототипа, часто выгодно отличаются от него устойчивостью к болезням, экологическим стрессам, а иногда несколько изменённой биосинтетической способностью и более высокой продуктивностью.
Для увеличения спектра изменчивости используют мутагенез (обработка мутагенными веществами), а также селективные условия культивирования клеток. Спонтанно возникшие или индуцированные мутанты в популяции отбираются на устойчивость к созданным жёстким условиям: высоким концентрациям солей, экстремальным температурам, гербицидам, токсинам и др. В результате проведения многих экспериментов удаётся отобрать действительно устойчивые линии и получить растения-регенеранты из стабильной клеточной линии.В СНГ методом клеточной селекции получены клоны: сорта картофеля, устойчивые к высоким концентрациям хлорида натрия, низким температурам, раку картофеля, а также патогену и токсину, вызывающим кольцевую гниль клубней; рис, устойчивый к низким температурам и засолению, и др.
Клеточная селекция — одна из наиболее полезных клеточных технологий для создания сортов не только важнейших сельскохозяйственных, но и лекарственных растений. Работы А.Г. Воллосовича в 70-80-х гг. XX в. с культурой тканей раувольфии змеиной привели к созданию высокопродуктивных аймалинсодержащих штаммов.
В настоящее время интенсивно развиваются работы по созданию высокопродуктивных штаммов и растений-регенерантов методами гибридизации соматических (неполовых) клеток путём слияния протопластов и генной инженерии. Методы соматической гибридизации и генной инженерии пока не получили промышленного развития. Однако учёные считают, что за ними будущее, и генная инженерия станет естественным приёмом при создании нужных человеку форм полезных растений.
Велико значение культуры тканей высших растений для быстрого клонального микроразмножения растений. Клональным микроразмножением называют неполовое размножение растений in vitro, строго идентичных исходному. Этот процесс «миниатюрен» в сравнении с традиционной техникой вегетативного размножения черенками, отводками, усами, прививками, но идёт очень быстро и с высоким выходом посадочного материала. Например, от одной генициали можно получить 105-106 растений в год.
В зависимости от условий клетки в культуре in vitro могут делиться анархически, образуя неорганизованную массу, либо менять программу своего поведения и делиться организованно с образованием зачатков корней, стеблей, зародышей, из которых затем можно регенерировать растения.
Легче всего вызвать морфогенез (образование органов и тканей) и регенерацию растения в целом, используя зародыши, почки, а также стеблевые меристемы. Но для получения растений, даже из зародышей, изолированных на ранних стадиях развития, или апикальных меристем стебля очень маленьких размеров нужны дополнительные условия, например, очень богатые питательные среды. Обычно в каждом случае разрабатываются особые условия культивирования и соответствующие питательные среды.
Стеблевая меристема (особенно самая её верхушка), как правило, свободна от вирусной инфекции, микоплазм и возбудителей других инфекций. Поэтому клонирование клеток меристематических верхушек, а затем быстрое клональное размножение здоровых растений — основа технологии получения безвирусного посадочного материала картофеля, плодовых, ягодных, декоративных и лекарственных растений.
Велико значение технологии клонального микроразмножения в селекции растений. Можно быстро размножить уникальный генотип или новый сорт, что ускоряет его практическое использование. В настоящее время найдены условия размножения более 500 экономически важных или исчезающих видов дикорастущих растений. Многие из них размножаются уже в производственных условиях. Что касается лекарственных растений, технологии клонального микроразмножения разработаны в отделе биологии клетки и биотехнологии Института физиологии растений РАН для мандрагоры туркменской, кирказона маньчжурского, женьшеня, в Санкт-Петербургской химико-фармацевтической академии — для ряда видов раувольфии, в ВИЛАРе — для стефании гладкой.
| | следующая лекция ==> | |
Способы заготовки сырья | | | Заготовительные организации и их функции |
refac.ru
КУЛЬТУРА КЛЕТОК И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ
В самом общем смысле культура клеток и тканей (далее — культура тканей) - это искусственное in vitro индуцирование делений клеток или выращивание в пересадочной культуре тканей, возникших путём пролиферации клеток изолированных сегментов разных частей растения.
Основоположниками культуры растительных тканей как новой области биологической науки считаются Ф. Уайт и Р. Готре (начало XX в.). В конце 30-х гг. XX в. был разработан метод выращивания растительных клеток в суспензионной культуре и получения биомассы от единичных клеток, что позволило выделять однородный в генетическом и физиологическом отношении материал.
В странах бывшего СССР освоение метода культуры тканей начато с конца 50-х гг. XX в. и связано с именем Р.Г. Бутенко. В 1967 г. по инициативе И.В. Грушвицкого в Ленхимфарминституте (ныне Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия) была создана первая в стране лаборатория культуры тканей лекарственных растений. Позже подобные лаборатории были созданы во Всероссийском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) (Москва) и Томском медицинском институте (ныне Сибирский государственный медицинский университет).
Первоначально разрабатываемый в чисто теоретическом плане метод культуры тканей, начиная с середины 60-х годов XX в., входит в арсенал особого направления научно-производственной деятельности, известного под названием биотехнология. Технологии, основанные на методе культуры тканей, уже помогают создавать новые формы и сорта сельскохозяйственных растений и получать промышленным путём продукты растительного происхождения.
Все объекты, культивируемые in vitro, выращиваются стерильными. Стерилизуются исходные кусочки ткани растений (экспланты), питательная среда; антисептически в специальных боксах стерильным инструментом проводятся манипуляции по выращиванию объектов. Сосуды, в которых культивируются ткани и клетки, закрываются так, чтобы предотвратить инфицирование в течение продолжительного времени.
В культуре тканей лекарственных растений можно выделить три главных направления: получение недифференцированной каллусной массы, создание исходного генетического разнообразия форм растений, а также клеточную селекцию и клональное микроразмножение растений.
В природе каллусообразование — естественная реакция на повреждение растений. В культуре изолированных тканей при помещении экспланта (т.е. фрагмента ткани или органа) на питательную среду его клетки дедифференцируются, переходят к делению, образуя однородную недифференцированную массу — каллус.
В асептических условиях каллус отделяют и помещают на поверхность агаризованной питательной среды для дальнейшего роста. В результате получают культуру каллусной ткани, которую можно поддерживать неограниченно долго, периодически разделяя её на трансплантаты и пересаживая на свежую питательную среду.
Каллусы легко образуются на эксплантах из различных органов и частей растений: отрезков стебля, листа, корня, проростков семян, фрагментов паренхимы, тканей клубня, органов цветка, плодов, зародышей и т.д. Культивирование каллусных клеток проводят главным образом двумя способами: на агаризованных питательных средах или различных гелеобразующих подложках (силикагель, биогели, полиакриламидные гели, пенополиуретан и др.) и в жидкой питательной среде. В жидкой питательной среде каллус легко распадается на отдельные агрегаты клеток и даёт начало так называемой суспензионной культуре.
В разработке нетрадиционных клеточных технологий важное место занимают питательные среды. Они должны обеспечить потребности культуры ткани продуцента в химических компонентах, необходимых для биосинтеза целевого продукта. В состав сред входят смеси минеральных солей (макро- и микроэлементов), фитогормоны (регуляторы процессов клеточного деления и дифференциации), источники углерода в виде сахарозы. Имеют значение температура, освещение, содержание газов и другие условия.
Одна из важных особенностей культуры тканей — сохранение в ряде случаев способности к синтезу продуктов вторичного метаболизма, свойственных интактным растениям данного вида, — алкалоидов, гликозидов, компонентов эфирных масел, стероидов и др.
В культивируемых каллусных клетках, особенно при длительном выращивании in vitro, возникают, сохраняются в клеточных поколениях, а часто и селектируются, т.е. отбираются и начинают преобладать, многочисленные геномные вариации. Эта изменчивость представляет собой основу для отбора клеточных линий и штаммов с высокой биосинтетической способностью (суперпродуцентов). Хотя использование сырья, получаемого при культуре тканей и клеток in vitro, выгодно пока только для тех продуктов, рыночная стоимость которых достаточно высока на международном рынке, тем не менее, биотехнологические программы уже созданы в СНГ и многих странах мира.
Переход от научных разработок к промышленному получению продуктов с использованием клеточных культур только начинается. Однако этим методом уже получают некоторые высокоценные вещества и продукты. В Японии из культивируемых тканей воробейника краснокорневого получают шиконин с широким спектром антисептического действия и убихинон-10 из клеток табака, в Германии — кислоту розмариновую из колеуса. В нашей стране биохимические заводы выпускают клеточную биомассу женьшеня, а также получены высокоаймалиновые штаммы раувольфии змеиной.
Каллусные клетки в культуре тканей in vitro подвержены значительной генетической изменчивости. Изменчивость геномов может приводить к генетическим изменениям у растений-регенерантов, полученных из культуры каллусных клеток, клеточных суспензий или изолированных протопластов. Такие растения получили название сомаклональных вариантов. Сомаклональные варианты, сохраняя основные свойства прототипа, часто выгодно отличаются от него устойчивостью к болезням, экологическим стрессам, а иногда несколько изменённой биосинтетической способностью и более высокой продуктивностью.
Для увеличения спектра изменчивости используют мутагенез (обработка мутагенными веществами), а также селективные условия культивирования клеток. Спонтанно возникшие или индуцированные мутанты в популяции отбираются на устойчивость к созданным жёстким условиям: высоким концентрациям солей, экстремальным температурам, гербицидам, токсинам и др. В результате проведения многих экспериментов удаётся отобрать действительно устойчивые линии и получить растения-регенеранты из стабильной клеточной линии.
В СНГ методом клеточной селекции получены клоны: сорта картофеля, устойчивые к высоким концентрациям хлорида натрия, низким температурам, раку картофеля, а также патогену и токсину, вызывающим кольцевую гниль клубней; рис, устойчивый к низким температурам и засолению, и др.
Клеточная селекция — одна из наиболее полезных клеточных технологий для создания сортов не только важнейших сельскохозяйственных, но и лекарственных растений. Работы А.Г. Воллосовича в 70-80-х гг. XX в. с культурой тканей раувольфии змеиной привели к созданию высокопродуктивных аймалинсодержащих штаммов.
В настоящее время интенсивно развиваются работы по созданию высокопродуктивных штаммов и растений-регенерантов методами гибридизации соматических (неполовых) клеток путём слияния протопластов и генной инженерии. Методы соматической гибридизации и генной инженерии пока не получили промышленного развития. Однако учёные считают, что за ними будущее, и генная инженерия станет естественным приёмом при создании нужных человеку форм полезных растений.
Велико значение культуры тканей высших растений для быстрого клонального микроразмножения растений. Клональным микроразмножением называют неполовое размножение растений in vitro, строго идентичных исходному. Этот процесс «миниатюрен» в сравнении с традиционной техникой вегетативного размножения черенками, отводками, усами, прививками, но идёт очень быстро и с высоким выходом посадочного материала. Например, от одной генициали можно получить 105-106 растений в год.
В зависимости от условий клетки в культуре in vitro могут делиться анархически, образуя неорганизованную массу, либо менять программу своего поведения и делиться организованно с образованием зачатков корней, стеблей, зародышей, из которых затем можно регенерировать растения.
Легче всего вызвать морфогенез (образование органов и тканей) и регенерацию растения в целом, используя зародыши, почки, а также стеблевые меристемы. Но для получения растений, даже из зародышей, изолированных на ранних стадиях развития, или апикальных меристем стебля очень маленьких размеров нужны дополнительные условия, например, очень богатые питательные среды. Обычно в каждом случае разрабатываются особые условия культивирования и соответствующие питательные среды.
Стеблевая меристема (особенно самая её верхушка), как правило, свободна от вирусной инфекции, микоплазм и возбудителей других инфекций. Поэтому клонирование клеток меристематических верхушек, а затем быстрое клональное размножение здоровых растений - основа технологии получения безвирусного посадочного материала картофеля, плодовых, ягодных, декоративных и лекарственных растений.
Велико значение технологии клонального микроразмножения в селекции растений. Можно быстро размножить уникальный генотип или новый сорт, что ускоряет его практическое использование. В настоящее время найдены условия размножения более 500 экономически важных или исчезающих видов дикорастущих растений. Многие из них размножаются уже в производственных условиях. Что касается лекарственных растений, технологии клонального микроразмножения разработаны в отделе биологии клетки и биотехнологии Института физиологии растений РАН для мандрагоры туркменской, кирказона маньчжурского, женьшеня, в Санкт-Петербургской химико-фармацевтической академии — для ряда видов раувольфии, в ВИЛАРе — для стефании гладкой.
infopedia.su
Культура изолированных клеток, тканей и органов растений
Культура клеток, тканей и органов растений представляет собой части растений, выращиваемые в асептических условиях на искусственных питательных средах, и включает:
каллусные культуры на гелеобразной (твердой) питательной
среде,
суспензионные культуры клеток в жидкой питательной среде,
культуру протопластов,
изолированные органы растений.
Первые попытки культивировать изолированные клетки и ткани растений были предприняты в конце XIX в. известными немецкими учеными Г. Габерландтом, X. Фёхтингом и С. Рехингером. Они пытались выращивать in vitro небольшие кусочки тканей растений, помещая их на влажную поверхность фильтра в растворе сахарозы. По аналогии с культурами животного происхождения, где использовались питательные среды природного происхождения (плазма крови, зародышевая жидкость), физиологи растений пытались выращивать клеточную массу, используя соки и экстракты растений. Первые опыты оказались не совсем удачными, поскольку транспорт и превращение питательных веществ у целого растения и изолированных растительных клеток существенно отличается. Лишь к началу 20-х гг. прошлого века ученые отказались от использования природных сред неопределенного состава в пользу синтетических сбалансированных сред. Основой послужили среды, используемые для выращивания целых растений.
Описанный период может считаться лишь предысторией метода культуры тканей и клеток растений. Настоящее развитие этого метода началось с работ Филиппа Уайта в США и Роже Готре во Франции. В результате их исследований в 30-х гг. XX столетия было установлено, что изолированные органы, ткани и клетки растений могут расти в культуре in vitro неограниченно долго при пассировании (пересадках) их на свежую питательную среду при определенных условиях. Многие ткани, введенные ими в культуру, существуют в пассированной культуре по настоящее время.
Культура клеток и тканей лекарственных растений - сравнительно молодая отрасль науки. Впервые культуру тканей лекарственного растения, а именно барвинка розового, получил Уайт в 1945 г. В 1947 г. в лаборатории Готре была получена культура ткани белены черной и показана ее способность вырабатывать соответствующие алкалоиды. В конце 50-х гг. XX в. был разработан метод массового выращивания клеток и тканей глубинным способом в жидких питательных средах.
В СССР первые лаборатории по исследованию культур изолированных тканей и клеток лекарственных растений были открыты на базе Института физиологии растений АН СССР под руководством член-корр. АН СССР Р.Г. Бутенко, в Ленинградском химико-фармацевтическом институте, во Всесоюзном институте лекарственных растений и в Томском медицинском институте (ТМИ). В ТМИ лаборатория была организована при кафедре фармакогнозии и ботаники под руководством профессора Л.Н. Березнеговской.
С культурами изолированных тканей и клеток работают по разным направлениям почти во всех странах Европы, в том числе и в России, а также Северной и Южной Америке, Азии, особенно в Китае, Индии, Японии.
Похожие статьи:
poznayka.org
Культура ткани — Мегаэнциклопедия Кирилла и Мефодия — статья
- Бутенко Р. Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М., 1964.
- Новые методы культуры животных тканей: Пер. с англ. М., 1976.
- Перт С. Дж. Основы культивирования микроорганизмов и тканей: Пер. с англ. М., 1978.
- Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М., 1991.
megabook.ru
КУЛЬТУРА КЛЕТОК И ТКАНЕЙ РАСТЕНИЙ
В самом общем смысле культура клеток и тканей (далее — культура тканей) - это искусственное in vitro индуцирование делений клеток или выращивание в пересадочной культуре тканей, возникших путём пролиферации клеток изолированных сегментов разных частей растения.
Основоположниками культуры растительных тканей как новой области биологической науки считаются Ф. Уайт и Р. Готре (начало XX в.). В конце 30-х гг. XX в. был разработан метод выращивания растительных клеток в суспензионной культуре и получения биомассы от единичных клеток, что позволило выделять однородный в генетическом и физиологическом отношении материал.
В странах бывшего СССР освоение метода культуры тканей начато с конца 50-х гг. XX в. и связано с именем Р.Г. Бутенко. В 1967 г. по инициативе И.В. Грушвицкого в Ленхимфарминституте (ныне Санкт-Петербургская государственная химико-фармацевтическая академия) была создана первая в стране лаборатория культуры тканей лекарственных растений. Позже подобные лаборатории были созданы во Всероссийском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) (Москва) и Томском медицинском институте (ныне Сибирский государственный медицинский университет).
Первоначально разрабатываемый в чисто теоретическом плане метод культуры тканей, начиная с середины 60-х годов XX в., входит в арсенал особого направления научно-производственной деятельности, известного под названием биотехнология. Технологии, основанные на методе культуры тканей, уже помогают создавать новые формы и сорта сельскохозяйственных растений и получать промышленным путём продукты растительного происхождения.
Все объекты, культивируемые in vitro, выращиваются стерильными. Стерилизуются исходные кусочки ткани растений (экспланты), питательная среда; антисептически в специальных боксах стерильным инструментом проводятся манипуляции по выращиванию объектов. Сосуды, в которых культивируются ткани и клетки, закрываются так, чтобы предотвратить инфицирование в течение продолжительного времени.
В культуре тканей лекарственных растений можно выделить три главных направления: получение недифференцированной каллусной массы, создание исходного генетического разнообразия форм растений, а также клеточную селекцию и клональное микроразмножение растений.
В природе каллусообразование — естественная реакция на повреждение растений. В культуре изолированных тканей при помещении экспланта (т.е. фрагмента ткани или органа) на питательную среду его клетки дедифференцируются, переходят к делению, образуя однородную недифференцированную массу — каллус.
В асептических условиях каллус отделяют и помещают на поверхность агаризованной питательной среды для дальнейшего роста. В результате получают культуру каллусной ткани, которую можно поддерживать неограниченно долго, периодически разделяя её на трансплантаты и пересаживая на свежую питательную среду.
Каллусы легко образуются на эксплантах из различных органов и частей растений: отрезков стебля, листа, корня, проростков семян, фрагментов паренхимы, тканей клубня, органов цветка, плодов, зародышей и т.д. Культивирование каллусных клеток проводят главным образом двумя способами: на агаризованных питательных средах или различных гелеобразующих подложках (силикагель, биогели, полиакриламидные гели, пенополиуретан и др.) и в жидкой питательной среде. В жидкой питательной среде каллус легко распадается на отдельные агрегаты клеток и даёт начало так называемой суспензионной культуре.
В разработке нетрадиционных клеточных технологий важное место занимают питательные среды. Они должны обеспечить потребности культуры ткани продуцента в химических компонентах, необходимых для биосинтеза целевого продукта. В состав сред входят смеси минеральных солей (макро- и микроэлементов), фитогормоны (регуляторы процессов клеточного деления и дифференциации), источники углерода в виде сахарозы. Имеют значение температура, освещение, содержание газов и другие условия.
Одна из важных особенностей культуры тканей — сохранение в ряде случаев способности к синтезу продуктов вторичного метаболизма, свойственных интактным растениям данного вида, — алкалоидов, гликозидов, компонентов эфирных масел, стероидов и др.
В культивируемых каллусных клетках, особенно при длительном выращивании in vitro, возникают, сохраняются в клеточных поколениях, а часто и селектируются, т.е. отбираются и начинают преобладать, многочисленные геномные вариации. Эта изменчивость представляет собой основу для отбора клеточных линий и штаммов с высокой биосинтетической способностью (суперпродуцентов). Хотя использование сырья, получаемого при культуре тканей и клеток in vitro, выгодно пока только для тех продуктов, рыночная стоимость которых достаточно высока на международном рынке, тем не менее, биотехнологические программы уже созданы в СНГ и многих странах мира.
Переход от научных разработок к промышленному получению продуктов с использованием клеточных культур только начинается. Однако этим методом уже получают некоторые высокоценные вещества и продукты. В Японии из культивируемых тканей воробейника краснокорневого получают шиконин с широким спектром антисептического действия и убихинон-10 из клеток табака, в Германии — кислоту розмариновую из колеуса. В нашей стране биохимические заводы выпускают клеточную биомассу женьшеня, а также получены высокоаймалиновые штаммы раувольфии змеиной.
Каллусные клетки в культуре тканей in vitro подвержены значительной генетической изменчивости. Изменчивость геномов может приводить к генетическим изменениям у растений-регенерантов, полученных из культуры каллусных клеток, клеточных суспензий или изолированных протопластов. Такие растения получили название сомаклональных вариантов. Сомаклональные варианты, сохраняя основные свойства прототипа, часто выгодно отличаются от него устойчивостью к болезням, экологическим стрессам, а иногда несколько изменённой биосинтетической способностью и более высокой продуктивностью.
Для увеличения спектра изменчивости используют мутагенез (обработка мутагенными веществами), а также селективные условия культивирования клеток. Спонтанно возникшие или индуцированные мутанты в популяции отбираются на устойчивость к созданным жёстким условиям: высоким концентрациям солей, экстремальным температурам, гербицидам, токсинам и др. В результате проведения многих экспериментов удаётся отобрать действительно устойчивые линии и получить растения-регенеранты из стабильной клеточной линии.
В СНГ методом клеточной селекции получены клоны: сорта картофеля, устойчивые к высоким концентрациям хлорида натрия, низким температурам, раку картофеля, а также патогену и токсину, вызывающим кольцевую гниль клубней; рис, устойчивый к низким температурам и засолению, и др.
Клеточная селекция — одна из наиболее полезных клеточных технологий для создания сортов не только важнейших сельскохозяйственных, но и лекарственных растений. Работы А.Г. Воллосовича в 70-80-х гг. XX в. с культурой тканей раувольфии змеиной привели к созданию высокопродуктивных аймалинсодержащих штаммов.
В настоящее время интенсивно развиваются работы по созданию высокопродуктивных штаммов и растений-регенерантов методами гибридизации соматических (неполовых) клеток путём слияния протопластов и генной инженерии. Методы соматической гибридизации и генной инженерии пока не получили промышленного развития. Однако учёные считают, что за ними будущее, и генная инженерия станет естественным приёмом при создании нужных человеку форм полезных растений.
Велико значение культуры тканей высших растений для быстрого клонального микроразмножения растений. Клональным микроразмножением называют неполовое размножение растений in vitro, строго идентичных исходному. Этот процесс «миниатюрен» в сравнении с традиционной техникой вегетативного размножения черенками, отводками, усами, прививками, но идёт очень быстро и с высоким выходом посадочного материала. Например, от одной генициали можно получить 105-106 растений в год.
В зависимости от условий клетки в культуре in vitro могут делиться анархически, образуя неорганизованную массу, либо менять программу своего поведения и делиться организованно с образованием зачатков корней, стеблей, зародышей, из которых затем можно регенерировать растения.
Легче всего вызвать морфогенез (образование органов и тканей) и регенерацию растения в целом, используя зародыши, почки, а также стеблевые меристемы. Но для получения растений, даже из зародышей, изолированных на ранних стадиях развития, или апикальных меристем стебля очень маленьких размеров нужны дополнительные условия, например, очень богатые питательные среды. Обычно в каждом случае разрабатываются особые условия культивирования и соответствующие питательные среды.
Стеблевая меристема (особенно самая её верхушка), как правило, свободна от вирусной инфекции, микоплазм и возбудителей других инфекций. Поэтому клонирование клеток меристематических верхушек, а затем быстрое клональное размножение здоровых растений - основа технологии получения безвирусного посадочного материала картофеля, плодовых, ягодных, декоративных и лекарственных растений.
Велико значение технологии клонального микроразмножения в селекции растений. Можно быстро размножить уникальный генотип или новый сорт, что ускоряет его практическое использование. В настоящее время найдены условия размножения более 500 экономически важных или исчезающих видов дикорастущих растений. Многие из них размножаются уже в производственных условиях. Что касается лекарственных растений, технологии клонального микроразмножения разработаны в отделе биологии клетки и биотехнологии Института физиологии растений РАН для мандрагоры туркменской, кирказона маньчжурского, женьшеня, в Санкт-Петербургской химико-фармацевтической академии — для ряда видов раувольфии, в ВИЛАРе — для стефании гладкой.
megaobuchalka.ru
Культуры клеток и тканей растений и животных
Количество просмотров публикации Культуры клеток и тканей растений и животных - 815
Несмотря на успехи, достигнутые в области использования различных микроорганизмов, микробная биотехнология имеет целый ряд существенных недостатков. Прежде всего это невозможность получения целых классов жизненно важных для человека соединений, таких как алкалоиды, стероиды, многие полифенолы и терпеноиды, поскольку в природных сообществах микроорганизмов не найдены продуценты этих веществ. По той же причине ограничены и возможности биотрансформационных процессов с участием микроорганизмов.
Другим объектом биотехнологического производства, помимо одноклеточных микроорганизмов могут выступать специально культивируемые клетки и ткани высших растений и животных. Эта область биотехнологии стала развиваться относительно недавно, последние 30-40 лет. При этом идеи и первые попытки их реализации возникли еще в конце XIX века.
В конце XIX - начале XX в. немецкие ученые X. Фехтинг (1892), С. Рехингер (1893), Дж. Хаберландт (1902) сделали первую неудачную попытку стимуляции роста растительных тканей и органов, помещенных на фильтровальную бумагу, пропитанную сахарозой. Несмотря на отсутствие положительного результата͵ их работы представляют большой интерес. В них были высказаны идеи, которые намного опередили развитие науки того времени и которые нашли свое подтверждение несколько десятилетий спустя. Так, Фехтинг предположил, что полярность присуща не только организму или органу растения, но и самой клетке. Рехингер определил минимальный размер сегмента͵ образующего каллус. Согласно его исследованиям, в кусочках ткани тоньше 1,5-2,0 мм клетки не делились. Хаберланд впервые четко сформулировал идеи о возможности культивирования in vitro изолированных клеток растений и о тотипотентности клеток, т. е. способности любой соматической клетки полностью реализовывать свой потенциал развития. Иначе говоря, о способности каждой растительной клетки давать начало целому организму.
Первые успехи были получены в 1922 ᴦ. американским ученым В.Роббинсом и немецким ученым В. Котте. Независимо друг от друга они показали возможность выращивания меристем кончиков корней томатов и кукурузы на синтетической питательной среде. Считается, что их работы легли в основу метода культуры изолированных корней растения.
В 1907ᴦ. Р.Гаррисон открыл новый путь изучения живой клетки многоклеточных организмов, показав, что клетки зачатка нервной системы зародыша лягушки в капле лимфы остаются живыми, дифференцируются, из них вырастают нервные волокна. Этим было положено начало созданию метода культуры животных клеток, который, главным образом благодаря работам Карреля, послужил мощным толчком к дальнейшему развитию цитологии и биотехнологии. Метод культуры клеток используется и развивается в самых различных направлениях. Посредством его был, прежде всего, получен очень важный результат; было доказано, что, подобно бактериям и простейшим, клетки многоклеточных организмов могут развиваться в культуре в течение неопределенно долгого времени. Каррелевская культура клеток сердца эмбриона курицы поддерживалась путем пересевов в питательной среде, содержащей эмбриональный экстракт и плазму крови, с 1912 по 1946 г, за что ученый был удостоен Нобелевской премии.
Дальнейшие успехи в разработке метода культур клеток были обуслов-лены, главным образом, созданием и усовершенствованием питательных сред, содержащих необходимые для жизни клеток вещества. Настоящее развитие метода культуры тканей и клеток высших растений началось в 1932 ᴦ. с работ французского ученого Р. Готре и американского исследователя Ф.Уайта. Οʜᴎ показали, что при периодической пересадке на свежую питательную среду кончики корней могут расти неограниченно долго. Вместе с тем, ими были разработаны методы культивирования новых объектов: тканей древесных растений камбиального происхождения, каллусных тканей запасающей паренхимы (Р. Готре), а также тканей растительных опухолей (Ф.Уайт). С этого момента начинаются массовые исследования по разработке новых питательных сред, включающих даже такие неконтролируемые компоненты, как березовый сок или эндосперм кокоса, и по введению в культуру новых объектов. К 1959ᴦ. насчитывалось уже 142 вида высших растений, выращиваемых в стерильной культуре.
В 1955 ᴦ. после открытия Ф. Скугом и С. Миллером нового класса фитогормонов - цитокининов - оказалось, что при совместном их действии с другим классом фитогормонов - ауксинами - появилась возможность стиму-лировать деление клеток, поддерживать рост каллусной ткани, индуцировать морфогенез в контролируемых условиях.
Основы использования клеток человека и животных в биотехнологии были заложены в 1949 г, когда группе американских ученых удалось вырастить вирус полиомиелита в культивируемых клетках кожи и мышц человеческого зародыша. Теперь уже не представляет проблемы производство в ферментерах клеточных культур, содержащих вирус. Существуют клетки, которые используют для выращивания: вирусов во всем мире. Это клетки HeLa (карцинома шайки матки человека), BHK-2I (почка эмбрионов хомяка) и Vero (почка зеленой мартышки). Благодаря применению метода клеточных культур вирусы стали выделять в чистом виде, что позволило усовершенствовать методы диагностики вирусных заболеваний и самое главное - получить вакцины, такие, к примеру, как против ящура, оспы, кори, полиомиелита.
Культуры клеток, тканей или органов широко использовались и используются сейчас в научных исследованиях. Οʜᴎ являются методом сохранения жизнеспособности или выращивания вне организма отдельных клеток, а также организованных структур (ткани, органы, эмбрионы) сохраняющих свою дифференцировку. С того времени, как ученые нашли способ выделения чистых клеточных линий, метод культуры клеток стал идеальным способом изучения строения и свойств живых клеток. Культуры клеток, получаемые современными методами, представляют из себягомогенные популяции генетически однородных клеток, растущих в постоянных условиях.
Культивируемые клетки дают возможность изучать прижизненное (витальное) состояние клеток методом микроскопии. На животном или растении можно определить состояние клеток организма только в конце эксперимента͵ удалив клетки из организма животного. С помощью культур клеток изучают межтканевые и межклеточные взаимодействия, дифференцировку, рост, деление клеток, их вирусную трансформацию, особенности обмена веществ в живых клетках, потребности их в питании, методы клонирования и хранения, чувствительность к различным веществам, в т.ч. лекарствам, ядам. Культуры клеток обеспечивают реальные значения скорости включения и метаболизма исследуемых соединений в клетках, поскольку отсутствует метаболизм этих веществ печенью, запасание их в мышцах, экскретирование почками. На клетках культур делают различные операции: удаляют части клетки, вводят в нее вирусы, проводят генетические эксперименты. Органные культуры используются при изучении закономерностей развития зачатков органов в норме и в эксперименте, при совместном культивировании органов от разных особей одного или нескольких видов, а также для изучения способов сохранения жизнеспособности изолированных органов и тканей, предназначенных для пересадки (трансплантации).
Культуры клеток животных и человека могут служить и уже служат идеальным источником различных биологически активных веществ: ферментов, антигенов, онкогенных и моноклональных антител, гормонов, инсулина, интерферона. Многие из этих препаратов, к примеру, половые гормоны, инсулин, интерферон, антитела, получаемые от животных, или генноинженерными методами из микроорганизмов не обладают достаточной специфичностью или алергенны, в связи с этим малоэффективны для человека.
При этом попытки получения полезных веществ с помощью культур клеток часто заканчиваются неудачей. Многие клетки животных и особенно человеческие плохо размножаются в культуральной среде, а если и растут, то в большинстве случаев теряют способность к синтезу специфического продукта. По этой причине основным направлением исследований в настоящее время является выработка методов культивирования, позволяющих клеткам сохранять и усиливать ценные специфические функции, в течение длительного времени выращивания. Одними из самых эффективных методов получения стабильных, долго живущих и относительно неприхотливых к условиям культивироввания клеточных культур является их трансформация (обработка некоторыми химическими реактивами или инфицирование их онковирусами) или получение гибридных клеток (гибридом) путем слияния их с некоторыми опухолевыми клетками.
В отличие от вышесказанного, промышленная реализация возможностей культивирования клеток и тканей растений достигла в настоящее время гораздо больших результатов. Во многих странах запущены промышленные производства лекарственных веществ, красителей, витаминов, основанные на различных способах культивирования растительных клеток. Начало было положено японскими фирмами, запустивших в начале 80-х годов ХХ века промышленное производство красителя шиконина и убихинона-10. В СССР было налажено промышленное производство биомассы клеток женьшеня.
Использование культур клеток и тканей как источника сырья для производства различных первичных и вторичных метаболитов имеет целый ряд преимуществ, по сравнению с традиционно используемыми источниками (дикие и культурные растения и животные, живые люди-доноры и органы, извлекаемые из трупов).
1.Возможность круглогодичного выращивания крайне важно го количества биомассы клеток и тканей.
2.Независимость от климатических и географических факторов.
3. Быстрота накопления целевого продукта (многие растения и животные растут и развиваются в течение десятков лет (женьшень)).
4. Стандартность и более высокое качество сырья.
5. Освобождение земельных площадей, техники и людей, занятых в сельском хозяйстве.
6. Возможность автоматизации и механизации технологических процессов, снижение доли ручного труда.
7. Освобождение страны от импорта сырья.
8. Сохранение редких и исчезающих видов животных и растений, улучшение экологической обстановки.
Существует 3 базовых направления создания новых технологий на базе культивируемых клеток и тканей растений. Первое из них – использование результатов исследования биологии растительной клетки и методов клеточной и генной инженерии для генетического изменения клетки и получения на ее базе нового растения. Второе – получение ценных биологически активных веществ растительного происхождения в промышленных масштабах путем культивирования клеток и тканей растений. Третье –использование культур клеток и тканей для быстрого микроклонального размножения и оздоровления растений.
referatwork.ru